Amerikalı karakter oyuncusu Stephen Root, 17 Kasım 1951 tarihinde Florida eyaletinin Sarasota şehrinde dünyaya geldi. ABD ve Meksika'daki çeşitli inşaat projelerinde saha müdürlüğü yapan bir babanın oğlu olarak büyüdü; bu yüzden çocukluğu boyunca ailesiyle birlikte sürekli yer değiştirdi. Vero Beach Lisesi'nden mezun olduktan sonra Florida Üniversitesi'nde iki yıllık bir önlisans programını tamamladı ve ardından Güzel Sanatlar alanında lisans derecesini oyunculuk üzerine yaptı.
Bu süreçte aldığı eğitimin ardından 2008 yılında üniversite tarafından seçkin mezunlarından biri olarak onurlandırıldı.
Root'un sahne deneyimi 1986 yılında başladı ve Broadway'e adımını 1990 yılında So Long on Lonely Street oyunundaki Kral Vaughnum III rolüyle attı. Ardından Arthur Miller'ın All My Sons eserinde Frank Lubey karakterini canlandırdı. 2015 yılında ise Marjorie Prime oyununda Jon rolüyle izleyici karşısına çıktı.
Sinema ve televizyonda geniş bir yelpazeye yayılan kariyerinde Root, NBC'nin ünlü sitcomu NewsRadio'da döküntücü patron Jimmy James karakteriyle tanındı. 1999 yapımı Office Space filminde ofis çalışanı Milton Waddams'ı canlandırarak unutulmaz bir performans sergiledi. 1997'den 2010'a kadar yayınlanan King of the Hill animasyonunda hem nahoş askeri rütbeli Bill Dauterive hem de sert iş adamı Buck Strickland seslendirmeleriyle hafızalara kazındı.
Coen kardeşlerin filmografisinde sıkça karşımıza çıkan Root, O Brother, Art Thou (2000) başta olmak üzere The Ladykillers (2004), No Country for Old Men (2007), The Ballad of Buster Scruggs (2018), The Tragedy of Macbeth (2021) gibi yapımlarda rol aldı. Diğer önemli filmleri arasında Dave (1993), DodgeBall (2004), Idiocracy (2006), Cedar Rapids (2011), Selma (2014), Trumbo (2015), Get Out (2017) ve On the Basis of Sex (2018) sayılabilir.
HBO'nun kara komedi dizisi Barry'de (2018-2023) canlandırdığı acımasız menajen Monroe Fuches / The Raven karakteriyle dikkatleri üzerine toplayan Root, bu rolüyle 2019 yılında Komedi Dizilerinde En İyi Yardımcı Erkek Oyuncu dalında Emmy Ödülü'ne aday gösterildi.
